尊龙凯时推出的乙型肝炎病毒(HBV) rcDNA探针法荧光定量PCR试剂盒是一款基于探针法荧光定量PCR原理开发的高效检测试剂盒,具有以下显著特点:
产品特点
1. 即开即用:用户仅需准备样品DNA模板,无需复杂的预处理流程。
2. 高灵敏度:经过优化的引物及其他组分,确保实验结果的准确性。
3. 提供阳性对照:便于用户有效区分假阴性样品,提升测试的可靠度。
4. 高特异性:引物设计基于高度保守的中间普雷沃菌DNA序列,避免与其他生物样本DNA产生交叉反应。
5. 多功能检测:此试剂盒支持定性和定量检测,其中定量检测的线性范围至少为5个数量级。
6. 足够实验次数:每个试剂盒可支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
7. 研究专用:本产品仅适用于科研用途。
使用方法
一、DNA提取
选择适合的方法提取纯化样品DNA,本试剂盒与市面上多数核酸提取试剂盒兼容。
二、稀释标准曲线样品
为了避免污染,建议在独立区域进行稀释操作:
1. 标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
2. 向每个管中加入45μL DEPC-H2O。
3. 往7号管中加入5μL阳性对照,充分震荡,得到1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品。
4. 使用相同方法逐步稀释,直至得到6个稀释度的标准曲线样品。
若无需制作标准曲线,可将阳性对照直接稀释至1×10E5拷贝/μL。
三、试剂配制
准备N+2个qPCR管,其中包含N个待检样品、1个阴性对照和6个阳性对照,依照说明将相应成分加入各PCR管中。
四、添加模板
向每个qPCR管中加入2μL模板,添加顺序为阴性对照、待测样品模板和阳性对照,离心30秒后立即进行扩增反应。
五、扩增反应
将PCR管放置于PCR扩增仪器的样品槽中,按照说明书中的扩增程序进行操作。
六、结果分析
1. 若制作标准曲线,以阳性对照浓度的log值为横轴,Ct值为纵轴绘制标准曲线,推算待测样品的浓度。
2. 如果未制作标准曲线,依据以下标准判定结果:阳性对照Ct值<30,阳性;阴性对照Ct值38或无Ct值,阴性;样本检测Ct值<35为阳性,Ct值38或无Ct值为阴性,介于35-38之间的样本需复检。
运输与保存
本产品需低温运输,保存在-20℃下,保存期限为一年。阳性对照应单独放置,以免污染其他试剂。
选择尊龙凯时的乙型肝炎病毒(rcDNA)探针法荧光定量PCR试剂盒,确保实验的准确与高效。